A. 什麼是酶聯免疫法
酶聯免疫法是將免疫技術發展為檢測體液中微量物質的固相免疫測定方法,即酶聯免疫吸附測定法。
1971年瑞典學者Engvall和Perlmann,荷蘭學者Van Weerman和Schuurs分別報道將免疫技術發展為檢測體液中微量物質的固相免疫測定方法,即酶聯免疫吸附測定法 (Enzyme-Linked ImmunoSorbent Assay , ELISA) 。
ELISA現在已成為目前分析化學領域中的前沿課題 ,它是一種特殊的試劑分析方法,是在免疫酶技術( immunoenzymatic techniques ) 的基礎上發展起來的一種新型的免疫測定技術 。
酶標抗體標記效果測定:測定內容包括酶和抗體活性、結合物中酶含量和IgG含量、酶與IgG摩爾比值以及結合率。
酶聯免疫法基本原理
①使抗原或抗體結合到某種固相載體表面,並保持其免疫活性。
②使抗原或抗體與某種酶連接成酶標抗原或抗體,這種酶標抗原或抗體既保留其免疫活性,又保留酶的活性。在測定時,把受檢標本(測定其中的抗體或抗原)和酶標抗原或抗體按不同的步驟與固相載體表面的抗原或抗體起反應。
用洗滌的方法使固相載體上形成的抗原抗體復合物與其他物質分開,最後結合在固相載體上的酶量與標本中受檢物質的量成一定的比例。
加入酶反應的底物後,底物被酶催化變為有色產物,產物的量與標本中受檢物質的量直接相關,故可根據顏色反應的深淺來進行定性或定量分析。由於酶的催化頻率很高,故可極大地放大反應效果,從而使測定方法達到很高的敏感度。
ELISA可用於測定抗原,也可用於測定抗體。在這種測定方法中有3種必要的試劑:
①固相的抗原或抗體
②酶標記的抗原或抗體
③酶作用的底物(顯色劑)。根據試劑的來源和標本的性狀以及檢測的具備條件,可設計出各種不同類型的檢測方法。
B. 酶聯免疫檢測的方法及原理是什麼
(1)酶聯免疫吸附試驗(enzyme linked immunosorbent assay,ELISA):是將抗原或抗體吸附在固相載體表面。使抗原抗體反應在固相載體表面進行。可用間接法、雙抗體夾心法或競爭法測定抗原或抗體。
(2)夾心法(sandwich assay):將已知的特異抗體包裝在固相載體(塑料板凹孔或紙片上),加入待檢標本,標本中的抗原即可與載體上的抗原結合,洗去未結合的材料後加入該抗原的酶標記抗體,洗去未結合的酶標抗體,加底物顯色,用酶免疫檢測儀測量顏色的光密度,可定量測定抗原。
間接法(indirecr ELISA)常用於檢查特異抗體。先將已知特異抗原包被固相載體,加入待檢標本(可能含有相應抗體),再加入酶標抗Ig的抗全(即第二抗體),經加底物顯色後,根據顏色的光密度計算出標本中抗體的含量。
(3)BAS-ELISA:近年來對酶免設分析法的改進是使用生物素-親合素-過氧化物酶復合物作為指示劑,組成一新的生物放大系統進一步提高檢測的敏感度。可用來檢測多種抗原抗體系統如細菌、病毒、腫瘤細胞表面抗原等。一個親合素(avidin)分子可以結合4個生物素分子(biotin)。結合非常穩定。親合素和生物素都可與抗全、酶、熒光素等分子結合,而不影響後者的生物活性。一個抗體分子可偶聯90個生物素分子,通過生物素又可連接多個親合素。因此大提高檢測的敏感度。目前應用生物-酶標親合素系統(biotinavidin system- ELISA,BAS-ELISA),它是通過生物素標記抗體連接免疫反應系統,同時藉助生物素化酶或酶標親合素引入酶與底物反應系統。
C. 什麼是酶聯免疫
酶免疫測定(enzyme immunoassay,EIA),是將酶催化作用的高效性與抗原抗體反應的特異性相結合的一種微量分析技術。酶標記抗原抗體後形成的酶標記物,既保留抗原或抗體的免疫活性,又保留酶的催化活性。當酶標記物與待測樣品中相應的抗原或抗體相互作用時,可形成酶標記抗原抗體復合物。利用復合物上標記的酶催化底物顯色,其顏色深淺與待測樣品中抗原或抗體的量相關。該方法靈敏度可達到ng~pg/ml水平。常用的標記物有辣根過氧化物酶HRP和鹼性磷酸酶AP等。
D. 大神,高手,這究竟是酶聯免疫法三代還是四代
酶聯免疫法分為三代、四代的 四代的比較好一些
E. 化學發光法和酶聯免疫法的區別
1、原理上的區別
化學發光法依據化學檢測體系中待測物濃度與體系的化學發光強度在一定條件下呈線性定量關系的原理,利用儀器對體系化學發光強度的檢測,而確定待測物含量。
酶聯免疫法原理是在測定時把受檢標本和酶標抗原或抗體與固相載體表面的抗原或抗體起反應加入酶反應的底物後,底物被酶催化變為有色產物,產物的量與標本中受檢物質的量直接相關,故可根據顏色反應的深淺來進行定性或定量分析。
2、分類上的區別
化學發光法依據供能反應的特點,可將化學發光分析法分為普通化學發光分析法,供能反應為一般化學反應;生物化學發光分析法,供能反應為生物化學反應;電致化學發光分析法,供能反應為電化學反應。根據測定方法又可分為直接測定CL分析法、偶合反應CL分析法等。
酶聯免疫法根據測定方法可分為雙抗體夾心法;雙位點一步法;間接法測抗體法,利用酶標記的抗體以檢測已與固相結合的受檢抗體;競爭法,以測定抗原為例,受檢抗原和酶標抗原競爭與固相抗體結合,因此結合於固相的酶標抗原量與受檢抗原的量呈反比。
3、作用上的區別
化學發光法在痕量金屬離子、各類無機化合物、有機化合物分析及生物領域都有廣泛的應用。
酶聯免疫法可用於測定抗原,也可用於測定抗體,ELISA現在已成為目前分析化學領域中的前沿課題 。
F. 關於酶聯免疫法檢測的一些問題!
1、你說的試紙,應該是試紙條(卡),是快速檢測的一種,試紙條每次一個,一次性使用。
2、酶聯免疫法是化驗的一種方法:酶聯免疫法,簡稱ELISA。它的中心就是讓抗體與酶復合物結合,然後通過顯色來檢測。步驟其實很簡單:ELISA用血清來檢測,首先血液要經過至少半個小時的凝集,然後取血清(這是有些網友不理解為什麼醫院抽完了血對血置之不理的原因,其實是誤會)。將酶復合物用稀釋液稀釋後,加血清及陰性、陽性對照,還有就是質控品(這是嚴格的要求,它的范圍必須在質控范圍內)。經過一個小時的孵育,然後洗板,加底物,半個小時避光反應後加終止液即完成反應部分,然後就是讀數。由數值來判斷結果的陰性或陽性。
3、做酶聯免疫的板有90個孔,分別檢測90份樣品(可以是不同人的),檢測時間很快,一個半小時內完成。
G. 什麼是酶聯免疫
酶聯免疫法,簡稱ELISA。它的中心就是讓抗體與酶復合物結合,然後通過顯色來檢測。步驟其實很簡單:ELISA用血清來檢測,首先血液要經過至少半個小時的凝集,然後取血清(這是有些網友不理解為什麼醫院抽完了血對血置之不理的原因,其實是誤會)。將酶復合物用稀釋液稀釋後,加血清及陰性、陽性對照,還有就是質控品(這是嚴格的要求,它的范圍必須在質控范圍內)。經過一個小時的孵育,然後洗板,加底物,半個小時避光反應後加終止液即完成反應部分,然後就是讀數。由數值來判斷結果的陰性或陽性。嚴格的講,如果第一次檢測為陽性的話,無論是哪個實驗室,必須按照CDC的HIV操作規程來進行第二次檢測,第二次的方法必須與第一次的不同,如還是陽性,將送確認實驗室確認。有的醫院很不負責,將初篩陽性的報告發出後就不管了,這是不對的。必須經過確認實驗室確認後才可出陽性診斷。祝大家。PS,第一次檢測為陽性的話,一定要去確認實驗室再做一次,勇敢的去面對,也許結果就不一樣了。
H. 血液製品概念股龍頭有哪些
血製品概念股相對強勢,一方面是因為產品價格提價,另一方面則是因為漿站設立速度加快,上市公司業績有望提速,值得跟蹤。A股市場中血製品概念股有華蘭生物、博雅生物等。
血製品概念股一覽
華蘭生物:分站陸續獲批,采漿量高增長可期
事件:近日,公司全資子公司華蘭生物(002007)工程重慶有限公司收到重慶市衛計委印發的華蘭生物石柱縣單采血漿站魚池分站的《單采血漿許可證》。
預計2017年采漿量突破1000噸,夯實行業龍頭地位。1)公司現有漿站17個,數量僅次於上海萊士(002252)和天壇生物(600161),估計2015年采漿量700噸,僅次於上海萊士。本次石柱分站獲得采漿許可證之後,重慶6個分站均已可開始正式采漿,預計重慶地區漿站采漿量有望提升30%以上。隨著現有漿站潛力挖掘,2017年采漿量有望突破1000噸。2)從產品線來看,公司現有人血白蛋白、靜注人免疫球蛋白、凝血因子VIII、破傷風人免疫球蛋白、人纖維蛋白原等11個品種,為國內當前產品線最多的公司之一,整體盈利能力處於行業上游。
將享血製品行業量價提升機遇。2015年6月最高零售價取消以來,血製品產業鏈紅利釋放,漿站拓展積極性持續提升。1)從漿站設置來看,2014、2015年全國新批漿站約40個,近期重慶、廣東等地審批加快顯示部分省份漿站審批態度發生了積極的改變。公司目前獨享重慶、河南漿站資源,在兩地漿站獲批能力較強,僅重慶就還有9個縣未設置漿站,河南作為人口大省具有更大的發展潛力。2)從產品價格來看,在供不應求無法有效緩解之前,除了白蛋白可以從國外進口更低價格產品而無法提價外,其他產品都存在強烈的提價預期。靜丙出廠價保持穩步上漲態勢,預計未來有望保持年10%-20%提價幅度,特免、人纖維蛋白原等小品種價格彈性更大。我們認為血製品行業迎來量價齊升的景氣周期,公司作為行業龍頭,具有巨大的業績提升空間。
WHO預認證有望推動疫苗放量,提前布局單抗藍海市場。流感疫苗已獲WHO認證,流腦疫苗也即將獲得WHO認證,有望藉此進入規模超過10億美元的WHO疫苗采購系統,並藉此立足國際市場,對外出口將成為疫苗業務的新增長點。合資子公司華蘭基因工程有限公司專注於單抗業務,阿達木、利妥昔、貝伐、曲妥珠單抗等重磅品種的2014年銷售額都超過60億美元,國內仿製葯目前都處在臨床階段,上市後都有望成為上億元大品種,未來市場空間較大。
盈利預測與投資建議。預計公司2015-2017年EPS分別為1.08元、1.30元、1.61元,對應當前市盈率為39倍、33倍、26倍。我們認為公司為血製品一線企業,內生增長動力強勁,將充分分享行業景氣周期紅利,給予「買入」評級。
風險提示。血製品行業政策或發生變動;漿站或出現安全事故等。
博雅生物:業績超預期,量價齊升成長性強
事件:公司發布2015年業績預告,預計實現凈利潤1.35-1.67億元,同比增長30-60%。
業績超預期,血製品提價是核心原因。我們之前預測公司2015年凈利潤為1.34億元(+29%),此次業績預告超出我們預期的主要原因在於血製品提價對業績貢獻大。自發改委在2015年6月份取消最高零售價限制以來,血製品企業均紛紛提價。目前公司的靜丙提價幅度接近20%,纖原提價幅度更是超過100%,提價幅度和業績都超出市場預期。供不應求的現象長期存在是血製品提價的主要推動力,目前我國對血漿的年需求量超過8000噸,但年采漿量僅為6000噸左右,遠遠不能滿足市場需求。分產品來看,白蛋白可以從國外進口更低價格產品因而基本不存在提價空間;凝血因子VIII 主要由醫保支付因而提價空間較小;靜丙使用量大涉及人群廣因而也不可能出現大幅度提價;纖原屬於一次性用葯且葯佔比小,主要由患者自付,提價空間最大。公司靜丙所佔的市場份額小,主要跟隨行業而逐步提價;但纖原市場佔有率超過40%且技術壁壘高,擁有市場定價權,未來還存在巨大的提價空間。隨著血製品價格逐步提升,公司營收和利潤都將出現大幅度增長,推動業績高速成長。
漿站拓展能力強,采漿量實現跨越式增長。2014年公司僅有5個漿站投產,采漿量僅為130噸左右,但到2015年公司有3個新漿站開始投產,並新獲批2個漿站,漿站總數達到10個。公司2016年采漿量將達到284噸,同比增長60%,漿站數和采漿量均實現翻番。由於血製品供不應求現象嚴重,衛計委大力鼓勵各地政府放開漿站審批,2015年廣東、江西、新疆、河南等省份紛紛加大了漿站審批力度,行業回暖趨勢明顯。公司是江西省唯一的本土血製品企業,政府支持力度大,目前已經在江西獲批8個漿站,其中2個在2015年新獲批,未來每年獲批1-2個漿站是大概率事件。另外公司還在四川省廣安市獲批了2個漿站,四川地廣人多是國內采漿大省,公司未來很可能繼續獲批更多漿站。
業績預測與估值:考慮到公司血製品量價齊升趨勢明顯,我們大幅度提高公司盈利預測,預計2015-2017年EPS 分別為0.57元、1.21元、1.88元(原預測值分別為0.50元、0.85元、1.22元),對應PE 分別為68倍、32倍、21倍。公司血製品采漿量和價格均存在巨大的提升空間,未來成長性強,是業績彈性最高的血製品企業,維持「買入」評級。
風險提示:新產品開發或低於預期的風險、非血製品業務整合或不達預期的風險、新漿站投產進度或低於預期的風險。
科華生物:收購TGS100%股權,打造國內化學發光檢測平台
事件:出資2880萬歐元設立義大利公司,其中1880萬歐元用於收購TGS100%股權。
控股TGS和奧特診青島,強化化學發光產品線。公司與AltergonItalia共同出資設立科華義大利公司,科華通過香港子公司出資2880萬歐元佔80%股權,AltergonItalia將人員、設備和奧特診青島公司作為診斷業務資產注入新公司,出資完成後科華間接持有TGS和奧特診青島80%的權益,其中TGS主要產品是基於化學發光的優生優育和自身免疫疾病的診斷試劑,奧特診青島主要致力於研製全自動化學發光分析儀,通過收購豐富了科華在化學發光試劑的產品線並與現有的化學發光儀器形成協同。
構建國內化學發光診斷平台,拓展全球市場空間。TGS是瑞士IBSAInstitutBiochimiqueS.A.的全資孫公司,2014年收入規模1603萬歐元,凈利潤虧損17萬歐,按照收購價格1880萬歐元計算,TGS公司對應2014年PS倍數約為1.17倍,價格相對較低,公司核心產品是優生優育和自身免疫疾病的化學發光檢測試劑,以及代理的相應酶聯免疫檢測產品,細分領域技術優勢顯著,銷售網路覆蓋歐洲,開拓科華的海外市場;奧特診青島的子公司是母公司的重要研發平台,產品以化學發光分析儀為主,目前尚無銷售業績,新一代產品後續有望加速上市;公司通過引入TGS的優勢產品以及青島奧特診的技術,將全面建設公司的化學發光診斷平台,在科華現有化學發光分析儀的基礎上市場地位有望大幅提升,預計TGS的優生優育和自身免疫疾病的診斷試劑最快需要兩年時間通過CFDA認證,TGS的歐洲業務預計於明年開始貢獻利潤。
方源資本定增後帶來新變化,外延並購有望持續。今年大股東定增以來持續為公司帶來積極變化:1、上半年引入明星管理團隊,剝離真空采血管業務,收購四家控股公司的少數股東權益;2、三季度成立香港子公司,打造國際收購合作平台;3、與康聖環球全面合作,作為客戶深度綁定,並藉助其檢驗中心建設經驗布局該領域,後續股權合作可期。本次收購TGS明確了科華對外延方向和國際市場的態度,有望在化學發光診斷領域進行更多的外延發展。
IVD龍頭,外延可期,維持增持評級。公司是我國IVD龍頭企業,受益於國家診斷試劑行業的高增長及進口替代,鞏固國內龍頭地位並不斷拓展海外市場;公司內生產品結構不斷豐富升級,化學發光、分子診斷以及POCT有望繼續拉動公司業績增長;大股東方源資本的資源及資本運作能力有望帶來公司實現突破性外延擴張。我們維持15-17年預測EPS0.69元、0.86元、1.05元,對應市盈率39倍、32倍、26倍,維持增持評級。
博暉創新:IVD業務持續創新,拓展血液製品業務
主營業務IVD業務持續創新,進軍血液製品領域:公司致力於醫學檢驗產品的智能化、快速化、集成化,通過不斷的技術創新,目前已發展元素檢測、免疫檢測、微流控核酸檢測、原子熒光重金屬檢測、質譜分析等技術平台。2015年上半年收購河北大安48%的股權和6月份收購廣東衛倫30%的股權,新增血液製品業務。
微量元素業績拐點,二胎政策有利業績增長:
我國新生人口拐點已過,出生率及出生人口處於增長狀態,0-14歲人口數目也開始增長,公司微量元素業務於2015年上半年取得恢復性增長。全面二胎政策出台後,出於優生優育的考慮,作為孕檢的必檢項目,微量元素檢測業務有望大幅增長。
技術平台創新,向其他領域拓展:公司通過並購及技術創新,發展微流控核酸檢測、質譜分析等技術平台,增強公司的產品競爭力。收購北京銳光和美國Advion公司,獲得原子熒光儀器及小型化質譜儀器業務,同時利用收購公司的技術實力開發P-MS儀器,加強公司在元素分析領域的優勢;公司研發的微流控核酸檢測平台,解決傳統PCR分子診斷操作復雜、對操作者要求高的問題,開發的HPV檢測項目市場容量大,微流控平台具有良好的前景;公司建立免疫熒光層析技術及技術,用於測定維生素D及小兒腹瀉等疾病,與原有業務共用推廣渠道,市場前景可以期待。
進軍血製品業務,為公司帶來穩定現金流:我國血漿資源緊缺,需求不斷增長,產品供不應求,行業政策壁壘高,整個行業保持快速增長。河北大安與廣東衛倫存在業務協同能力,河北大安血漿資源豐富,廣東衛倫血製品批文更多,兩者合作可提高血漿綜合利用率,獲得更多高附加值的血液製品,有利於增強公司在血液製品板塊的盈利能力和競爭力。
盈利預測與投資評級:公司微量元素檢測業務出現拐點,未來5年內有望保持較為穩定的增長;微流控平台儀器已經獲得的批件,HPV晶元將於2016年上半年獲批,預計當年將能夠帶來一定的業績,隨著市場推廣及後續產品的不斷推出,微流控平台的分子診斷業績將會迅速增長;並購大安制葯及廣州衛倫獲得稀缺血製品資源,如能獲得CFDA批准調撥計劃,血製品將能夠為公司帶來穩定的現金流。按照大安制葯並購的利潤承諾,2015-2018年預計攤薄後對應EPS分別為0.10、0.17、0.26、0.37元,對應PE為239X、147X、95X、67X。看好公司在元素分析領域保持領先地位,血液製品業務帶來穩定的現金流,微流控晶元技術平台和質譜平台潛在市場空間難以估量,繼續維持「增持」評級。
風險提示:微流控晶元產品研發進度風險;大安制葯業績承諾不達預期等。
ST生化:加碼主業,脫帽重生
事件:公司公告稱擬向控股股東振興集團非公開發行募集資金總額不超過 23億元,扣除發行費用後擬用於:(1)廣東、廣西等五省10家單采血漿站工程建設項目;(2)血液製品生產基地二期工程建設項目;(3)細胞培養基工業化研發和生產線建設項目;(4)償還所欠信達資產債務;(5)補充流動資金。
加碼主業,血製品龍頭正在崛起。1)我國血製品供不應求的現象將長期存在, 行業處於持續景氣狀態,最高零售價放開後,我們預計血製品將會呈現每年5%-10%的階梯式逐步提升,給血製品企業貢獻更多利潤。2)公司目前的5個成熟漿站合計采漿量300噸左右;4個在建漿站2016年有望投產;此次定增還將新增10個漿站,預計未來3年內新增漿站數約20個,漿站總數將達到30個左右。隨著新漿站的采漿,公司未來投漿總量上升,預計在建及籌建的漿站運營成熟後公司采漿量峰值超過1000噸,有望成為國內血製品行業領頭羊。
擬設立細胞培養基子公司,進軍生物製品產業鏈上游。1)生物葯是醫葯行業的未來發展趨勢,細胞培養基作為生產生物葯的關鍵原材料,產業地位十分重要,前景值得看好。2)目前國際整體細胞培養基工業市場的年銷售額約50億美元,並以每年10%以上的速度增長。中國市場上95%的培養基都需要依賴從美國進口,昂貴的進口原材料價格極大地拖累了中國生物製品企業的利潤,細胞培養基國產化的需求十分迫切。3)我們認為公司在該領域的率先布局有望佔領市場先機,填補國內市場空缺。
償還所欠信達資產債務,有望解決歷史遺留問題。截止2015年9月30日,公司對信達資產的負債為3.8億元。因該筆債務,信達資產申請法院凍結了公司所持子公司廣東雙林、振興電業股權。我們認為該筆債務的償還將消除公司核心資產廣東雙林股權被強制執行的風險,亦為剝離振興電業股權、完成股改承諾掃清障礙。解決了歷史遺留問題後公司將實現脫帽,輕裝上陣。
業績預測與估值:暫不考慮細胞培養基放量的情況下,我們預測公司2015-2017年攤薄後的EPS 分別為0.27元、0.42元和0.66元,對應PE 分別為107倍、69倍、43倍。從公司估值看,當前的5個槳站采漿量約300噸,博雅生物(300294)15年噸槳對應市值約0.4億,因此ST生化(000403)類比博雅對應市值至少120億,山西的4個槳站的投產及未來3年內新增的20個漿站都將為公司市值進一步提升打開的無限遐想,且此次定增後公司將實現脫帽,輕裝上陣,其優秀的血製品和細胞培養基資產將綻放光彩,看好其長期發展。首次覆蓋給予「買入」評級
風險提示:非公開發行失敗風險、漿站建設進度不達預期風險。
上海萊士:血液製品資源整合達預期
外延加內生式發展資源整合效果明顯。上海萊士通過一系列收購動作迅速確立了國內血液製品行業龍頭的地位,我們認為公司未來通過內生和外延式發展的邏輯不變。今年同路生物並表使得上半年公司收入增長51%,顯示了公司對於被收購資產整合效果明顯,整體營收持續快速增長,符合我們之前的預測。
作為目前國內血液製品行業中結構合理、產品種類齊全、血漿利用率較高的血液製品龍頭企業,上海萊士通過加強漿站布局和外延並購,迅速成為國內漿站(28家、含3家在建)、采漿量(900噸左右)和血液製品產能第一的企業,公司已經將發展目標定位為未來五年內成為世界級血液製品企業(采漿能力1500噸以上),我們預計公司未來在外延式擴張的方面將進一步取得較好的成績;收購同路生物後,公司在漿站布局方面的能力進一步提升,我們樂觀估計今明兩年內新漿站獲批幾率較大,公司在新設漿站布局及原有漿站提升采漿量方面具有巨大的增長潛力。
扣非後凈利潤增速較好凸顯公司成長價值。公司投資的萬豐奧威(002085)的股票受益於今年上半年的階段性牛市,產生了6.7億的投資收益(目前萬豐奧威股價與6月底相比只小幅下跌10%左右),這是公司上半年凈利潤增長379%的主要原因。公司扣非後凈利潤增速57%、高於收入增速,主要原因是由於公司對被收購企業的資源整合效果好,上海萊士與同路生物、鄭州萊士在研發、銷售、管理等方面的合力逐漸顯現,整體銷售費用和管理費用增速低於收入增速,並且同路生物新納入合並范圍以及銀行存款增加而使利息收入增加,綜合因素使得期間費用率比去年同期下降2個百分點。通過收購實現采漿量提升的同時,公司產品線也得到擴充(血液製品由原來的7個增加至11個),豐富的產品結構有效地提高了血漿的綜合利用率,使得血液製品(占公司營業收入97%)整體毛利率提升了2個百分點。期間費用率下降、產品毛利率提升帶動扣非後凈利潤增速較好,凸顯了公司的成長價值。
實際控制人增持及高送轉方案彰顯負責任的態度。此次10轉10的利潤分配預案是繼2014年中報之後,再度推出類似的分配方案,由於公司持股比例較為集中,此次高送轉分配完成後,將有利於提升公司股票的交易活躍度。今年7月初在市場大跌的背景下,公司前兩大股東分別表示要以不超過20億元增持公司股票,並已經逐步兌現承諾;在已陸續發布股東或高管增持計劃的股票當中,合計不超過40億元的增持計劃金額名列前茅。股東增持計劃和高送轉分配方案,彰顯了控股股東科瑞天誠和萊士中國對於全體股東負責任的態度以及對於公司持續健康發展的信心。
結論:作為民族血液製品龍頭企業,未來上海萊士將持續復制自身的「內生性增長加外延式並購」的快速發展模式,近三至五年公司采漿能力有望提升至1500噸以上;控股股東增持彰顯了良好的社會責任感及對於公司持續發展的信心;公司對被收購企業資源整合效果明顯,費用率下降、毛利率提升帶動扣非後凈利潤增速較好,凸顯了公司的成長價值。我們預計公司2015年-2017年的歸屬於上市公司股東凈利潤分別為13.5億元(含投資收益)、14.3億元和18.3億元,每股收益分別為0.98/1.04/1.33元,對應PE分別為83/79/62X。維持「強烈推薦」評級
I. 酶聯免疫反應吸附試驗(ELISA)共有幾種類型各有什麼特點
(一)雙抗體夾心法
雙抗體夾心法是檢測抗原最常用的方法,操作步驟如下:
(1)將特異性抗體與固相載體連接,形成固相抗體:洗滌除去未結合的抗體及雜質。
(2)加受檢標本:使之與固相抗體接觸反應一段時間,讓標本中的抗原與固相載體上的抗體結合,形成固相抗原復合物。洗滌除去其他未結合的物質。
(3)加酶標抗體:使固相免疫復合物上的抗原與酶標抗體結合。徹底洗滌未結合的酶標抗體。此時固相載體上帶有的酶量與標本中受檢物質的量正相關。
(4)加底物:夾心式復合物中的酶催化底物成為有色產物。根據顏色反應的程度進行該抗原的定性或定量。
根據同樣原理,將大分子抗原分別制備固相抗原和酶標抗原結合物,即可用雙抗原夾心法測定標本中的抗體。
(二)雙位點一步法
在雙抗體夾心法測定抗原時,如應用針對抗原分子上兩個不同抗原決定簇的單克隆抗體分別作為固相抗體和酶標抗體,則在測定時可使標本的加入和酶標抗體的加入兩步並作一步(圖15-5)。這種雙位點一步不但簡化了操作,縮短了反應時間,如應用高親和力的單克隆抗體,測定的敏感性和特異性也顯著提高。單克隆抗體的應用使測定抗原的ELISA提高到新水平。
在一步法測定中,應注意鉤狀效應(hookeffect),類同於沉澱反應中抗原過剩的後帶現象。當標本中待測抗原濃度相當高時,過量抗原分別和固相抗體及酶標抗體結合,而不再形成夾心復合物,所得結果將低於實際含量。鉤狀效應嚴重時甚至可出現假陰性結果。
(三)間接法測抗體
間接法是檢測抗體最常用的方法,其原理為利用酶標記的抗抗體以檢測已與固相結合的受檢抗體,故稱為間接法。操作步驟如下:
(1)將特異性抗原與固相載體連接,形成固相抗原:洗滌除去未結合的抗原及雜質。
(2)加稀釋的受檢血清:其中的特異抗體與抗原結合,形成固相抗原抗體復合物。經洗滌後,固相載體上只留下特異性抗體。其他免疫球蛋白及血清中的雜質由於不能與固相抗原結合,在洗滌過程中被洗去。
(3)加酶標抗抗體:與固相復合物中的抗體結合,從而使該抗體間接地標記上酶。洗滌後,固相載體上的酶量就代表特異性抗體的量。例如欲測人對某種疾病的抗體,可用酶標羊抗人IgG抗體。
(4)加底物顯色:顏色深度代表標本中受檢抗體的量。
本法只要更換不同的固相抗原,可以用一種酶標抗抗體檢測各種與抗原相應的抗體。
(四)競爭法
競爭法可用於測定抗原,也可用於測定抗體。以測定抗原為例,受檢抗原和酶標抗原競爭與固相抗體結合,因此結合於固相的酶標抗原量與受檢抗原的量呈反比。操作步驟如下:
(1)將特異抗體與固相載體連接,形成固相抗體。洗滌。
(2)待測管中加受檢標本和一定量酶標抗原的混合溶液,使之與固相抗體反應。如受檢標本中無抗原,則酶標抗原能順利地與固相抗體結合。如受檢標本中含有抗原,則與酶標抗原以同樣的機會與固相抗體結合,競爭性地佔去了酶標抗原與固相載體結合的機會,使酶標抗原與固相載體的結合量減少。參考管中只加酶標抗原,保溫後,酶標抗原與固相抗體的結合可達最充分的量。洗滌。 (3)加底物顯色:參考管中由於結合的酶標抗原最多,故顏色最深。參考管顏色深度與待測管顏色深度之差,代表受檢標本抗原的量。待測管顏色越淡,表示標本中抗原含量越多。
(五)捕獲法測IgM抗體
血清中針對某些抗原的特異性IgM常和特異性IgG同時存在,後者會干擾IgM抗體的測定。因此測定IgM抗本多用捕獲法,先將所有血清IgM(包括異性IgM和非特異性IgM)固定在固相上,在去除IgG後再測定特異性IgM。操作步驟如下:
(1)將抗人IgM抗體連接在固相載體上,形成固相抗人IgM。洗滌。
(2)加入稀釋的血清標本:保溫反應後血清中的IgM抗體被固相抗體捕獲。洗滌除去其他免疫球蛋白和血清中的雜質成分。
(3)加入特異性抗原試劑:它只與固相上的特異性IgM結合。洗滌。
(4)加入針對特異性的酶標抗體:使之與結合在固相上的抗原反應結合。洗滌。
(5)加底物顯色:如有顏色顯示,則表示血清標本中的特異性IgM抗體存在,是為陽性反應。
(六)應用親和素和生物素的ELISA
親和素是一種糖蛋白,可由蛋清中提取。分子量60kD,每個分子由4個亞基組成,可以和4個生物素分子親密結合。現在使用更多的是從鏈黴菌中提取的鏈霉和素(strepavidin)。生物素(biotin)又稱維生素H,分子量244.31,存在於蛋黃中。用化學方法製成的衍生物,生物素-羥基琥珀亞胺酯(biotin-hydroxysuccinimide,BNHS)可與蛋白質、糖類和酶等多種類型的大小分子形成生物素化的產物。親和素與生物素的結合,雖不屬免疫反應,但特異性強,親和力大,兩者一經結合就極為穩定。由於1個親和素分子有4個生物素分子的結合位置,可以連接更多的生物素化的分子,形成一種類似晶格的復合體。因此把親和素和生物素與ELIS偶聯起來,就可大提高ELISA的敏感度。
親和素-生物素系統在ELISA中的應用有多種形式,可用於間接包被,亦可用於終反應放大。可以在固相上先預包被親和素,原用吸附法包被固相的抗體或抗原與生物素結合,通過親和素-生物素反應而使生物素化的抗體或抗在相化。這種包被法不僅可增加吸附的抗體或抗原量,而且使其結合點充分暴露。另外,在常規ELISA中的酶標抗體也可用生物素化的抗體替代,然後連接親和素-酶結合物,以放大反應信號。