丽珠集团卵泡

『壹』 常用促排卵药物，进口促排卵药有哪几种，进口促排卵药

2007年用药前三甲分别为75IU注射用重组人促卵泡激素，75IU注射用尿促性素和100IU0.5ML重组人促卵泡激素β注射液. 瑞士雪兰诺和荷兰欧加农公司分别独揽重组人促卵泡激素和重组促卵泡激素β市场，两个产品促卵泡生成素纯度超过99%，作用稳定，因此具有很大优势。本土企业由于技术与经费限制主要集中力量争夺尿促性素市场，丽珠集团制药厂和上海第一生化药业产品分别于1993年和1992年获准上市，资历都较长，但珠海丽珠凭借其高纯度尿提促卵泡激素使产品品质有所提升，在国内同类产品中脱颖而出，虽然价格大大高于其他国内产品，但仍低于进口产品，因此抢去进口产品的部分市场份额并实现了对尿促性素市场的统领。

『贰』 促排卵药物有哪些常见的有哪几种

2007年用药前三甲分别为75IU注射用重组人促卵泡激素，75IU注射用尿促性素和100IU0.5ML重组人促卵泡激素β注射液. 瑞士雪兰诺和荷兰欧加农公司分别独揽重组人促卵泡激素和重组促卵泡激素β市场，两个产品促卵泡生成素纯度超过99%，作用稳定，因此具有很大优势。本土企业由于技术与经费限制主要集中力量争夺尿促性素市场，丽珠集团制药厂和上海第一生化药业产品分别于1993年和1992年获准上市，资历都较长，但珠海丽珠凭借其高纯度尿提促卵泡激素使产品品质有所提升，在国内同类产品中脱颖而出，虽然价格大大高于其他国内产品，但仍低于进口产品，因此抢去进口产品的部分市场份额并实现了对尿促性素市场的统领。

『叁』 大家都是进口促排药吗

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『肆』 一张思维导图，看遍医药细分行业

看完了以银行、券商和保险为代表的大金融行业之后，我们接下来学习大消费行业中最重要的代表之一医药行业。

随着我国人口老龄化程度的不断加深，医药行业的未来发展有着坚实的群众基础。如果翻看医药行业的上市公司，可以发现在过去的十年中牛股辈出，出现了很多十倍股，给长期投资者以丰厚的回报。就冲这一点，就值得我们好好花上些时间，来学习一下如何投资医药行业。

有趣的是，除了高度的专业性之外，医药行业虽然被称为行业，其实它并不是一个业务和财务逻辑一致的行业，而是由完全不同逻辑的多个细分行业所组成的大集合。所以，我们“零基础学医药”这个系列的第一篇，就先来仔细梳理一下，医药行业到底有多少个细分子行业，并对它们一一加以简要介绍。

医药行业的细分，首先从医药分家开始。

说到医疗，大家首先会想到医院。医院是什么地方呢？是医生给病人看病的地方。医生做什么呢？为患者提供医疗服务。所以，从医的角度来讲，医药行业的第一个细分子行业就是 医疗服务 。

在A股的上市公司中，代表性的医疗服务企业是爱尔眼科。爱尔眼科是专业眼科连锁医疗机构，截至2019年，已在中国大陆30个省市区建立270余家专业眼科医院，覆盖全国医保人口超过70%，年门诊量超过650 万人。并且，在美国、欧洲和香港开设有80余家眼科医院。

从事 健康 体检业务的美年 健康 ，是医疗服务领域另一家代表性的企业。美年 健康 是一家以 健康 体检为核心，集 健康 咨询、 健康 评估、 健康 干预于一体的专业体检和医疗服务集团。公司总部位于上海，深耕布局北京、深圳、沈阳、广州、成都、武汉、西安、天津、重庆、杭州等200余个核心城市，布局400余家医疗及体检中心，专业服务团队拥有全职专家、医护及管理团队40000余人。2017年已为2000万人次提供专业 健康 服务，2018年体检人次预计将突破3000万大关，是医疗和大 健康 板块中市值和影响力杰出的上市公司。

此外，一些上市公司参控股民营医院，这部分业务也属于医疗服务。代表性的有复星医药投资的禅城医院，2018年初，禅城医院高分通过国际医院JCI认证，成为全国首家通过第六版JCI标准的三甲综合医院。

医疗服务行业，是一个非常好的行业，因为人总要生病，生病就需要去医院看病，由医生来提供医疗服务；而 健康 的人，也需要定期体检，来及早发现潜在隐患。这些都是刚性需求，几乎不受经济周期波动的影响。从供给的角度来看，专业的医生需要长期的学习与实践才能养成，其能提供的服务数量总体有限，因而医疗服务行业的价格长期来看都是不断增长的，能够有效战胜通胀。

说完了医，我们再来看看药。

我们这里的医药制造，是一个广义的概念，包括了医药的研发、生产和制造。首先，医药企业需要通过研发，来发现和创造一个新的药物，这就是创新药的概念，侧重点在研发。其次，一个新的药物通过医药企业研发出来，并通过了国家食药监局的审批之后，就可以大规模生产制造，准备上市了，这个环节的关键点在于生产。所以，广义的医药制造，其关键切分点就在于是否需要做创新药的研发。

创新药

如果一家药企，主要的精力放在研发上，以发现新的药物为主，那这家企业就是 创新药 企业。国际上，著名的医药企业都是创新药企业，比如辉瑞（Pfizer）、诺华（Novartis）、罗氏（Roche）、默克（Merck）、赛诺菲（Sanofi）、强生（Johnson & Johnson）、吉利德（Gilead Sciences）、葛兰素史克（GlaxoSmithKline）、艾伯维（AbbVie）、安进（Amgen）等。

在A股市场上，最著名的代表性创新药企就是恒瑞医药，也是目前市值最高的医药企业，最新市值高达2500亿元。恒瑞医药是一家从事医药创新和高品质药品研发、生产及推广的医药 健康 企业。截至2018年底，共有全球员工20000余人，是国内知名的抗肿瘤药、手术用药和造影剂的供应商，也是国家抗肿瘤药技术创新产学研联盟牵头单位，建有国家靶向药物工程技术研究中心、博士后科研工作站。

创新药企业，都有着高比例的研发投入。以恒瑞医药为例，公司 每年投入销售额10％以上 的研发资金，在美国、欧洲、日本和中国多地建有研发中心或分支机构。截至2018年底，公司的研发团队已有3000多人，其中包括2000多名博士、硕士及100多名海归人士。公司累计申请国内发明专利655项，拥有国内有效授权发明专利147项，欧美日等国外授权专利226项，专有核心技术获得国家 科技 进步二等奖2项，中国专利金奖1项。

仿制药

如果一家药企，主要的精力不是放在原创性的研发上，而是对于那些专利保护到期的药品进行仿制生产，那么这家企业就是 仿制药 企业。

仿制药的意义在于，其不需要高昂的研发投入，也不需要重复进行创新药批准之前所必须的多年临床前动物研究和人体临床研究，因而其生产成本要显著低于创新药。为了确保仿制药可以治病，仿制药需要与被仿药具有相同的活性成分、剂型、给药途径和治疗作用，即需要证明和原创药具有相同的生物等效性。

在我们国家，食药监局通过 一致性评价 ，来监管仿制药的疗效。只有那些通过仿制药一致性评价的药企，才能够销售该仿制药，并参与医保药品的竞标。所以， 通过一致性评价的仿制药数量 ，通常是考察一家仿制药企的研发实力的量化指标。

在A股市场上，代表性的仿制药企业有华东医药。公司主要从事抗生素、中成药、化学合成药、基因工程药品的生产销售，以及中西药、中药材、医疗器械等的批零经销业务，是一家集医药研发、制药工业、药品分销、零售、医药物流为一体的大型综合性医药上市公司。华东医药主要通过子公司中美华东来完成仿制药的生产，其2017年销售额超60亿元，是国内器官移植和糖尿病药物研发和生产领域领导企业。华东医药，是一家很有特点的企业，这从它的企业经营战略口号中可以窥见一斑：“ 不求品种很多，但求产品最大；要么唯一，要么第一；不一定要做火车头，但一定要乘上第一节车厢 ”。

除了以是否做原创性药品研发来分类之外，医药制造企业还可以按照药物的属性分为：

其中，化学药企还可以进一步细分为：

下面，我们分别介绍按照药物属性分类的各类药企。

原料药

原料药的英文简称为API（Active Pharmaceutical Ingredient），其是指用于药品制造中的任何一种物质或物质的混合物，而且在用于制药时，成为药品的一种活性成分。

具体来说，原料药企业又分为两个大类：

在A股市场中，代表性的大宗原料药企业是中小企业板第一股（002001）新和成。公司是一家主要从事营养品、香精香料、高分子新材料和原料药的生产和销售的国家级高新技术企业。公司是世界四大维生素生产企业之一、全国大型的香精香料生产企业和维生素类饲料添加剂企业。

特色原料药的代表性企业是华海药业。公司是中国首家通过美国FDA制剂质量认证并自主拥有ANDA文号的制药公司，也是首家在美国实现规模化制剂销售的中国制药公司。公司现有员工6500多人，在全球拥有40多家分子公司（包括美国、日本、德国、俄罗斯、西班牙、印度等）；主要业务覆盖化学药、生物药、医药包装、贸易流通等多个领域，与全球500多家制药企业建立了长期合作关系，为近200个国家和地区提供医疗 健康 产品，是全球主要的心血管、精神类 健康 医疗产品制造商之一。

大宗原料药，由于其类似大宗商品，使得其生产企业具有典型的 周期属性 。从投资的角度来看，比较像化工企业，行业低谷（低PB高PE）的时候买入，行业高峰（高PB低PE）的时候卖出。

特色原料药，主要是给下游的制剂企业、成品药企做配套，从而有着类似“ 苹果产业链 ”的特点。从投资的角度来看，主要看这家企业的下游客户是谁，如果前十大客户都是国际上著名的制药企业，那这家公司的实力就是不错的；如果前十大客户都是较少的制药企业，可能在投资上就需要谨慎一些。

化学制剂

药物制剂，通俗来说，就是将原料药和其他辅料（比如医用胶囊）加工成成品药物。在化学制剂这个领域，大部分药企都是仿制药企业。

在A股中，化学制剂企业还是比较多的，除了上文“仿制药”一节提到的华东医药之外，代表性的上市公司还有丽珠集团、信立泰、恩华药业等。

从投资的角度来看，主要考虑以下几点：

中成药

中成药是我们国家的一个特色，有着 历史 悠久的传统中医作为广泛的群众基础。按照是否需要医生开处方，中成药可以分为：

在A股市场中，代表性的中成药企业云南白药、同仁堂、东阿阿胶、片仔癀、天士力等。此外，中药饮片的代表性企业是康美药业。

生物药

生物药物是指运用生物学、医学、生物化学等的研究成果，综合利用物理学、化学、生物化学、生物技术和药学等学科的原理和方法，利用生物体、生物组织、细胞、体液等制造的一类用于预防、治疗和诊断的制品。

通俗来说，生物药企业就是基于生物体来制造药物的企业。生物药有着众多的细分品类，包括：

在A股市场中，代表性的血制品企业是华兰生物。公司是一家从事血液制品、疫苗、基因工程产品研发、生产和销售的国家高新技术企业。也是我国血液制品行业中血浆综合利用率最高，品种最多、规格最全的企业之一。

代表性的疫苗企业有智飞生物、沃森生物和康泰生物，当然还包括疫苗事件的主角长生生物。其中，智飞生物是国内综合实力最强的上市民营生物疫苗供应和服务商之一。

代表性的重组蛋白药物企业是长春高新，主要的产品是重组人生长激素（辅助生长）和注射用重组人促卵泡激素（辅助生殖）。此外，还有生产重组人胰岛素的通化东宝，该公司使得中国成为继美国、丹麦之后的第三个能生产重组人胰岛素的国家。

代表性的单抗企业有复星医药旗下的复宏汉霖、信达生物制药、齐鲁制药等。

看完了医药制造之后，我们再来看看医药行业里面的另一个大的细分领域：医疗器械。与药品类似，医疗器械也是五花八门。

首先，我们来看看 制药装备 ，这是每一家药企所必需的。代表性的A股上市公司有东富龙和楚天 科技 。东富龙是一家为全球制药企业提供制药工艺、核心装备、系统工程整体解决方案的综合性制药装备服务商，是国内最大的冻干机设备制造商。楚天 科技 主营业务为水剂类制药装备的研发、设计、生产、销售和服务，是我国替代进口制药装备产品的代表企业。

制药装备，类似于基建领域的挖掘机，代表了下游药企GMP车间改造的需求，因而局部明显的 行业周期性 。当下游GMP改造需求大幅增长的时候，上游制药装备企业的订单就会放量增长，带来营业收入和净利润的明显增长；当下游GMP改造需求减弱时，订单就会大幅减少，营收和净利润就会显著下滑。

其次，我们来看看 高端医疗器械 ，比如常见的冠脉支架以及骨科的医疗器械。这些品种，往往单价都很高，终端价格甚至过万元，出厂价差不多是终端价格的三折（三零扣），体现了产品的高单价、高毛利特点。与此同时，三类医疗器械从开始进入临床，到最后获批可能需要五年甚至更长的时间，研发投入不菲，研发周期也较长，这一点和 创新药 类似。

在A股中，代表性的高端医疗器械公司是乐普医疗，公司是国内领先的心血管病植介入诊疗器械与设备的高端医疗产品产业集团，拥有国家 科技 部授予的国家唯一的国家心脏病植介入诊疗器械及装备工程技术研究中心，是国内高端医疗器械领域能够与国外产品形成强有力竞争的少数企业。乐普医疗的核心产品就是心脏支架，其产品研发也经过多次迭代，从最早的Partner系列，到Nano系列，再到正在申报的完全可降解的NeoVas系列，不断进行产品的研发升级。

最后，我们来看看医疗器械领域的大众消费品： 家用医疗器械 。常见的家用医疗器械包括血压计、制氧机、呼吸机、血糖仪、轮椅、拐杖等，这些产品和 非处方药 类似，偏消费属性，通常在药店购买。

在A股中，代表性的家用医疗器械公司是鱼跃医疗。鱼跃医疗是一家以提供家用医疗器械、医用临床器械和互联网医疗服务为主要业务的公司，产品主要集中在呼吸供氧、康复护理、医疗急救、手术器械、中医器械、护理类耗材、药用贴膏及高分子卫生辅料及提供医院消毒感染控制解决方案等领域。公司已成为了国内医疗器械行业领先企业，是国内最大的康复护理和医用供氧系列医械厂商。

与药品相比，医疗器械领域的天花板要低很多。在药品中，一个大的单品可以有几十亿甚至超过一百亿的年销售额，而医疗器械很难找到这样的单品。同时，在一个子领域取得成功的产品，通常不能将其成功经验复制到另一个子领域。这两个特点，使得医疗器械领域主要依靠外延式并购来扩大企业规模，这一点在国内最大的医疗器械上市企业迈瑞医疗的发展壮大过程中得到了充分的体现。

迈瑞医疗是中国最大、全球领先的医疗器械及解决方案供应商，产品覆盖生命信息与支持、体外诊断、医学影像三大主要领域。公司在中国超过 30 个省市自治区设有分公司，境外拥有 39 家子公司。全球员工近万人，其中研发人员占比超过 20%，外籍员工超过 10%，来自全球 30 多个国家及地区，形成了庞大的全球研发、营销和服务网络。

最后，我们再来看看医药商业。医药商业主要有两种业态（商业模式）：

国资背景企业在医药商业市场占绝对主导地位，全国排名前三的医药商业企业均为国资背景，分别是国药控股（港股）、华润医药（港股）和上海医药（A股）。一些地方性医药商业企业龙头同样有国资背景，如南京医药、华东医药、重庆医药、柳州医药、人民同泰等。

在A股种，医药零售的代表性企业是益丰药房。公司是国内领先的药品零售连锁企业之一，主要从事药品、保健品、医疗器械以及与 健康 相关的日用便利品等的连锁零售业务。截止2018年6月30日，公司在湖南、湖北、上海、江苏、浙江、江西、广东七省共开设了2,499家连锁门店，向顾客销售药品、医疗器械、保健品、 健康 食品、个人护理用品及与 健康 相关的日用便利品等商品。

从投资角度来看，医药零售主要是连锁药店模式，行业的发展主要依靠两个要素：一个是连锁药店的门店数量，通过自营、加盟以及并购的方式进行扩张；另一个是单店的经营效率，通过坪效、人均利润等指标考量。此外，随着处方药的逐步外流，考虑到处方药是一个万亿级别的大市场，而零售药目前还在三四千亿的水平，未来医药零售行业还有比较大的处方外流的空间。

由于医药行业的多元性，我们在这一篇中对其进行系统性梳理，将细分行业主要归结为四个方面，分别是医疗服务（医）、医药制造（药）、医疗器械（器械）和医药商业（流通）。

所有这些，我们通过如下的思维导图加以概括，方便读者阅读。

『伍』 大家都是进口促排药吗

我那会用的进口的,福特蒙.一天一千多.取卵时没有空泡，泡泡长得比较均匀.移植的鲜胚一次成功,好孕双胎,现在四个月了。祝姐妹一切顺利!

『陆』 卵巢卵泡发育的分离方法对移植卵巢卵泡发育的影响实验

目的
评估机械法、酶解法和酶解?机械结合法等分离方法对小鼠移植卵巢分离卵泡的发育及其生殖潜能的影响，建立更好的卵泡分离技术方案。
方法B6D2F1新生小鼠卵巢移植后分别用机械法、长时酶解法、短时酶解法或酶解?机械结合法分离卵巢组织中的腔前卵泡，分离回收卵泡在体外培养12 d时加入绒毛膜促性腺激素(hCG)处理26 h，收获卵丘复合体进行体外受精。
结果机械法的卵泡回收量、卵泡培养残存率、排卵率均高于酶解法，短时酶解法的排卵率高于长时酶解法;酶解机械结合法的平均卵泡回收量、平均排卵数、卵母细胞成熟率等多项指标均高于其他各组。
结论酶解机械结合法是分离小鼠卵泡良好的技术方案。
卵巢 卵泡 卵母细胞 培养技术 胚胎组织移植
人工诱导胚胎卵巢原始卵泡发育成熟可为受精机制研究和医疗性克隆提供充足的卵母细胞源。对异体移植发育到一定程度的卵巢进行生长卵泡分离是人工诱导卵泡发育的关键步骤之一[1?3]，迄今已经发展出两种卵泡分离技术，包括酶解分离法和机械分离法。这两种方法各有其缺点，使每个卵巢的卵泡回收率和成熟率均停留于较低水平。本研究探讨了酶解法、机械法和酶解?机械结合法等分离方法对小鼠移植卵巢分离卵泡的发育及其生殖潜能的影响，以期建立更好的卵泡分离技术方案。 1.1 动物 C57BL/6(B6)雌鼠、DBA/2(D2)雄鼠购自上海斯莱克实验动物有限责任公司[合格证：SCXK(沪)2007?005]，以B6雌鼠和D2雄鼠交配繁殖B6D2F1(F1)小鼠。小鼠饲养于恒温(25 ℃)动物房单笼独立通风系统(IVC?II型，苏州市冯氏实验动物设备有限公司)，光照14 h，黑暗10 h，自由饮水取食。
1.2 试剂 α?MEM?HEPES(42360?032)，α?MEM(32571?036)，胶原酶I(17100017)，脱氧核糖核酸酶(DNaseI，18047?019)及ITS(胰岛素?转铁蛋白?硒混合物)均为美国Gibco公司产品; rFSH(注射用重组人促卵泡激素，瑞士Serono公司);LH(黄体生成素，美国Sigma公司);hCG(中国丽珠集团丽珠制药厂);FCS(胎牛血清)，penicillin/streptomycin(青霉素/链霉素)及KSOM+AA(MR?106?D)均为美国Chemicon公司产品。
1.3 卵巢移植 B6雌鼠(8～10周龄)与D2雄鼠(10周龄)4∶1合笼培育F1代，次日查到阴栓者记为E0.5 d;以20 d为孕期，预产期前3 d每日早晚查看孕鼠是否生产;断颈处死新生12 h以内F1小鼠，取出双侧卵巢待移植。异戊巴比妥(15 mg/mL)麻醉成年(8～10周)F1雌鼠(移植受体)。消毒小鼠背部，在肋脊角区做纵向切口进入腹腔，切除双侧卵巢，然后在左侧肾被膜下植入新生小鼠卵巢2枚，层层缝合伤口。待受体鼠清醒后送回鼠舍。
1.4 卵泡分离 新生小鼠卵巢移植14 d后，将受体鼠断颈处死，从肾被膜下取出移植的卵巢，卵巢移植物约2 mm大小，表面可见丰富的重构血管，在体视镜下可清晰观察到卵巢移植物中的卵泡。用1 mL注射器(320310，美国BD公司)的针尖将每枚卵巢均匀横切为2块，4块卵巢组织混合后随机分组进行分离。
1.4.1 A组(单纯机械法) 将卵巢组织块转移至卵泡分离操作液(α?MEM?HEPES，10%FCS，100 IU/mL penicillin，100 mg/mL streptomycin，不含胶原酶和DNA酶)中，在带有37 ℃恒温热盘(MATS?U55SZX2A，奥林巴斯)的体视显微镜下，用精细尖镊 (直5#，T1?181，中国淮安特申医疗器械有限公司)剥离卵巢中的卵泡。每隔5 min，即将已剥离的完整卵泡转移至事先装有1 mL卵泡培养液(α?MEM，5%FCS，0.1 IU/mL FSH，0.01 IU/mL LH，1%ITS)的35 mm培养皿中。共分离4次，总时间约20 min。
1.4.2 B组(长时酶解法) 将卵巢组织块用1 mL注射器针尖均切为3小块，置于500 μL卵泡酶解液(α?MEM?HEPES，3 mg/mL胶原酶I，1 mg/mL DNase I)中，在37 ℃、体积分数为0.05的CO2培养箱中消化20 min，第20分钟时将其从培养箱取出，用200 μL移液枪吹吸消化液30次。在体视显微镜下将游离出的结构完整的卵泡转移至事先装有1 mL卵泡培养液的35 mm培养皿中。
1.4.3 C组(短时酶解法) 将卵巢组织块用1 mL注射器针尖均切为3块，置于500 μL卵泡酶解液中，在37 ℃、体积分数为0.05的CO2培养箱中消化，每隔5 min即从培养箱中将组织取出，用200 μL移液枪吹吸消化液30次，在体视显微镜下观察是否有游离的卵泡，如有则将卵泡迅速转移至装有1 mL新鲜培养液的35 mm培养皿中。共消化20 min。
1.4.4 D组(结合法) 将卵巢组织块用1 mL注射器针尖均切成3块，转移至500 μL卵泡酶解液中，在37 ℃、体积分数为0.05的CO2培养箱中消化5 min。然后在带有37 ℃恒温热盘的体视显微镜下，在卵泡酶解液中用精细尖镊分离卵泡。每分离5 min，即将已分离得到的完整的卵泡转移至事先装有1 mL卵泡培养液的35 mm培养皿中。共分离4次，20 min。
1.5 双荧光染色 每组随机选取部分分离卵泡，放入Calcein AM(4 mmol/L，Sigma，C1359)和Ethidium Homodimer?I(10 mmol/L，Sigma，E1903)混合液中，37 ℃、体积分数为0.05的CO2培养箱中培养45 min;卵泡悬液置倒置荧光显微镜观察，在蓝光的激发下，活的卵泡发绿色荧光，死的卵泡发红色荧光，分别计数死、活卵泡数。
1.6 卵泡体外培养 各组分离所得卵泡分别进行体外培养12 d。第0天，分离得到的卵泡培养在加有1 mL培养液的35 mm培养皿中;第1天，加入1 mL新鲜培养液;此后每天半量换液;第12天全量换为卵泡成熟培养液(α?MEM，5%FCS，0.1 IU/mL FSH，0.01 IU/mL LH，1% ITS，1.5 IU/mL hCG);第13天，在加入卵泡成熟培养液后26 h收集排出的卵丘复合体(OGCs)。
1.7 体外受精 每组的OGCs分别行体外受精。卵母细胞受精培养4 h后从受精滴中洗出，转移至预先平衡过的KSOM+AA的小液滴中培养。观察卵母细胞的成熟率(以含有第一极体的卵母细胞百分率代表)、受精率(以双原核卵母细胞占有第一极体卵母细胞的百分率代表)。
1.8 统计学处理 采用SPSS 11.5软分析。4组的卵泡存活率、培养卵泡各阶段成熟率、排卵率运用单因素方差分析(one way ANOVA)，各组均数以最小显著差法(least significant difference, LSD)进行两两比较和显著性检验;卵母细胞成熟率和受精率采用χ2 检验。 2.1 分离卵泡回收量 经过分离操作后，显微镜下可见大量腔前卵泡，大部分卵泡呈圆或椭圆形，边界清楚，部分卵泡外周附有或多或少的卵巢间质组织，卵母细胞成圆形，位于卵泡中央，透明带清晰可见(图1A)。体视镜下回收卵泡边界清晰、光滑的卵泡，计数各组回收卵泡量(表1)。表1 各组卵泡回收量比较
2.2 双荧光染色结果 卵泡双荧光染色后，在蓝光的激发下，活细胞显示绿色荧光，死亡细胞则呈红色荧光。将卵母细胞呈绿色、卵泡细胞≥70%呈绿色者视为存活卵泡(图1B)。各组活卵泡的百分率见表2。表2 各组卵泡存活率比较
2.3 卵泡体外培养结果 每组卵泡在相同条件下培养12 d，计数5、12 d的卵泡残存率;在加入hCG 26 h后，计数排卵率。各组各项指标的结果见表3。表3 各组卵泡体外培养结果比较
2.4 体外受精结果 各组收获OGCs分别受精，获能精子密度控制在5×105 mL?1。早期胚置于KSOM+AA中培养，卵的密度为每20 μL含 15个。成熟率及受精率的计数结果见表4。D组成熟率高于其他3组，余3组之间差别无统计学意义;受精率4个组之间无差别。表4 各组体外成熟与受精结果比较 近年来，多种哺乳动物，如小鼠、兔、猪及人的卵泡诱导发育技术体系都获得了很大进展[4?7]。在这些体系中，大多倾向于将卵巢中的卵泡单独分离出来后再进行培养。有报道表明，分离卵泡只有其基底膜未受损伤并带有少量间质细胞、未成熟圆形卵母细胞位于其中央时，体外培养才能成功[8]。迄今常用的卵泡分离方法有两种，包括利用水解酶(如链霉蛋白酶、胶原蛋白酶和脱氧核糖核酸酶)消化卵巢的结缔组织而获得游离卵泡的酶解法和用锐利器械剥离出卵泡的机械法[6,9?10]。就目前的资料来看，两种方法各有优缺点。酶解法是细胞生物学研究中分离各种组织、器官中细胞的常用方法，因其操作简便有效而受到普遍应用。酶解法分离卵泡时，普遍采用胶原蛋白酶和脱氧核糖核酸酶组合配制成分离液。这种分离液利用酶消化卵巢间质组织中的胶原蛋白，使卵泡从卵巢组织释放出来，故在限定时间里可望收获较多的游离卵泡。有报道表明，用酶解法分离卵泡培养的卵母细胞可有更高成熟率和卵裂率的趋势[11]。但是，分离液长时间浸泡卵巢组织时，显然可能导致卵泡基底膜受到损伤，从而使卵泡在后续培养中更易于退化，降低了卵泡培养的残存率，因此酶的作用浓度和时间是个关键的问题。
用机械法分离卵泡，如果操作手法得当，可能保持卵泡基底膜的完整，从而在体外培养过程中更容易维持卵泡的立体结构，保障更高的培养残存率。Carrell等和Park等的结果显示，用机械法分离的卵泡，其残存率存活率显著高于用酶解法分离者[12?13];Shen等还进一步利用机械法来源的小鼠卵泡培育成熟卵母细胞并成功制备了IVF?ET小鼠[4]。但是，也有报道表明，移植后卵巢切片显示有些腔前卵泡的卵母细胞与其周围颗粒细胞的联系很薄弱[14]。用机械法从致密的卵巢间质组织中分离卵泡时，往往难于避免牵拉卵泡的力量过大，很容易破坏卵母细胞与颗粒细胞的连接，而卵母细胞和颗粒细胞的缝隙连接异常，会影响卵母细胞的发育并导致减数分裂阻断[15?16]。故机械法能否保障卵泡存活率在很大程度上依赖于操作技巧，同时在有限的分离操作时间里很难提高卵泡的回收量。从目前的报道来看，单用机械法从每枚卵巢中得到的卵泡数量非常有限，平均每个卵巢只有12.51和11.27个[4,14]。
本研究结果表明，酶解法的卵泡回收量、分离后卵泡培养的残存率、排卵率均低于机械法(表1，3)，但分离刚结束时的卵泡活率却高于机械法(表2)。此结果与Demeestere等的报道不符，却与Carrell等和Park等的报道相似[11?13]。说明酶解法在分离卵泡时对卵泡造成的直接损伤较少，但对卵泡的远期存活不利。值得注意的是，本研究采用酶解法分离卵泡时，设置了C组即短时酶解法，采用酶解过程中每隔5 min收获1次卵泡的改变法，而该组的排卵率显著高于常规的20 min酶解处理组，证明减少酶的作用时间是有价值的。
为了提高分离卵泡的回收量，同时又保障较高的培养残存率、排卵率和卵泡的生殖潜能，本研究建立了将酶解法和机械法相结合来分离新生小鼠卵巢移植物中腔前卵泡的技术方案。在结合法(D组)中，将卵巢组织块先在含有胶原蛋白酶和脱氧核糖核酸酶的分离液中37 ℃消化5 min，随即采用与单纯机械法相同的操作手法进行剥离，同时将剥离出的卵泡立即转移至不含酶的培养液中。此做法利用酶的消化作用使卵泡周围的结缔组织得到一定消化，卵巢组织变得比较松散，从而减少机械剥离时对卵泡的牵拉损伤，同时又使游离出的卵泡及时离开分离液，减少了水解酶对卵泡的作用时间，比单纯酶解法或单纯机械法更有利于保持卵泡的三维结构。实验结果表明，D组中分离后卵泡的存活率与单纯酶解法(B、C组)无差别，但高于单纯机械法(A组)，而每块卵巢的卵泡回收量、平均排卵数、卵母细胞成熟率多项指标均高于其他各组，说明结合法具有绝对优于两法单用的趋势。同时，采用结合法从每个卵巢移植块获得97.13个卵泡(相当于194卵泡/卵巢)其中40.66%达到排卵，显著高于国内外文献所报道的相应数据。值得注意的是，本研究用来源于4种分离方法所培育的卵母细胞进行体外受精，其受精率在各组间并无显著差异，说明分离技术只对卵泡在后续培养中的发育与成熟有影响，而对那些发育至成熟的卵母细胞的生殖潜能并无显著影响。
实验结果提示，本研究建立的酶解?机械结合法是一个良好的卵泡分离技术，对卵巢组织工程的技术进步具有实际应用价值。
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『柒』 孕妇可以打这种针水吗

孕妇多注意不要流产就好 保胎我感觉好像不用营养更得上才最重要 怎么说也是二个人吃